GIRLS DEFENCE — это игра, которая сочетает в себе элементы жанров action и tower defense. В мире этой игры, населённом только женщинами, все мужчины погибли из-за радиации после масштабной войны. Однажды выяснилось, что мёртвые парни превратились в зомби и пошли в наступление. Девушки начали обороняться от ходячих мертвецов.
Героиня по имени О после упорных тренировок присоединилась к армии и стала лучшим солдатом. В GIRLS DEFENCE она передвигается по локации влево или вправо и самостоятельно отстреливает нежить. В местах, где необходимо защищать точки, О расставляет своих коллег в три ряда. Бойцы в этой игре выполняют роль башен и отстреливают летающие мозги, слизней, медузоподобных существ и классических мертвяков.
Среди воительниц доступны: стрелок, огнеметчик, снайпер, гренадер, пулеметчик, защитник. Также есть дама с ракетницей и девушка, метающая гранаты, которые отскакивают от поверхностей. У каждого бойца есть свой запас здоровья. Если главная героиня погибает, то наступает конец игры. Аналогичное последствие влечёт за собой допущение проникновения группы зомби в город.
Основную девушку можно прокачивать за деньги. Помимо этого, валюта тратится на покупку новых юнитов. Валюта зарабатывается путём выполнения сюжетных и побочных заданий. Награда зависит от выбранного уровня сложности.